Фильм Ночь в музее 2 — продолжение одноимённой картины, в которой мы встретим всех старых героев — экспонатов Музея Естественной истории, которые оживают по ночам и живут обычной жизнью — ковбоев, древних людей, Теодора Рузвельта, римлян, фараонов, индейцев и даже скелет динозавра. Однако теперь музей переезжает в Федеральный архив, и всем представителям этой разношёрстной компании вскоре предстоит познакомиться с новыми экспонатами.

В Нью-Йоркский музей во время открытия выставки Ватиканских сокровищ ворвались четверо всадников, одетых как рыцари в 12 веке, и украли тайный средневековый декодер. Для археолога Тесс Чайкин и агента ФБР Шона Дэли это лишь начало полной загадок игры в кошки-мышки, им придется проехать три континента в гонке за врагом и за потерянной тайной Ордена Тамплиеров